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iUDI Plate LACEseq說(shuō)明書(shū)

發(fā)布時(shí)間:2022/6/30      點(diǎn)擊次數(shù):1199

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iUDI Plate LACEseq unique dual index Plate包含用于擴(kuò)增indexed Illumina®兼容NGS文庫(kù)的*雙索引PCR引物。這些引物可用于需要TruSeq的LACEseq套件中™可共用的

索引引物。

iUDI Plate LACEseq包含索引PCR引物,并提供多達(dá)24對(duì)*的雙索引,用于復(fù)用多達(dá)24個(gè)樣本。索引的PCR引物預(yù)先分配在96孔PCR板中。每個(gè)雙指數(shù)都有足夠的量,可用于5-10個(gè)反應(yīng)。

所有指標(biāo)均已通過(guò)功能驗(yàn)證,可與使用雙通道或四通道化學(xué)進(jìn)行堿基調(diào)用的Illumina測(cè)序系統(tǒng)協(xié)同工作。


一般注意事項(xiàng)

A、 最佳做法

•不建議iUDI板LACEseq索引板經(jīng)歷五次以上的凍融循環(huán)。

•使用前,取下蓋子。在室溫下解凍10分鐘,然后將盤(pán)子旋轉(zhuǎn)至試管底部的顆粒內(nèi)容物。確保板在打開(kāi)前沒(méi)有可見(jiàn)的冷凝水。在使用過(guò)程中,請(qǐng)將盤(pán)子放在冰上。

•準(zhǔn)備索引PCR時(shí),使用移液管j端刺穿板的密封,然后直接移取所需體積的索引引物。始終為每口井使用單獨(dú)的吸管頭,以避免指數(shù)交叉污染。使用后再次密封板,以避免溢出。


B、 產(chǎn)品兼容性

iUDI板帶

iUDI板LACEseq板設(shè)計(jì)用于LACEseqTM和PAGExtTM IMMAGINA產(chǎn)品(目錄號(hào)#LS-001和目錄號(hào)#KGE-002)。請(qǐng)參閱LACEseqTM和PAGExtTM試劑盒特定用戶(hù)手冊(cè),了解使用iUDI板中提供的索引PCR引物的說(shuō)明

LACEseq板。引物對(duì)未甲基化。


C、 多路復(fù)用和解擴(kuò)

重要的是選擇適當(dāng)且符合Illumina推薦兼容性要求的單一索引。LACEseq iUDI引物對(duì)的指數(shù)以四對(duì)為一組進(jìn)行顏色平衡

(1-4, 5-8, 9-12,13-16). 每組四個(gè)索引都是*顏色平衡的,可以合并排序。可以復(fù)用的樣本數(shù)少于四個(gè),但在合并之前要驗(yàn)證顏色平衡。不要跨行共享庫(kù)。

我們不建議將Imagina庫(kù)與其他供應(yīng)商的庫(kù)在同一個(gè)序列通道中進(jìn)行復(fù)用。雖然原則上這是可能的,但可能需要對(duì)索引組合、庫(kù)池條件和加載量進(jìn)行特定的優(yōu)化。對(duì)包含不同通道共享的不同庫(kù)類(lèi)型的復(fù)雜池進(jìn)行排序可能會(huì)對(duì)排序運(yùn)行度量、讀取質(zhì)量、讀取輸出和/或解復(fù)用性能產(chǎn)生不可預(yù)測(cè)的影響。Imagina對(duì)在同一通道(或運(yùn)行)中與外部庫(kù)類(lèi)型組合排序的Imagina庫(kù)的性能更改不承擔(dān)任何責(zé)任。

 


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