Encapsula NanoSciences是一家專業公司，致力于為學術和工業領域的客戶和合作伙伴提供脂質體研究，開發和制造專業知識，生產脂質納米粒子，也稱為脂質體。Encapsula常規提供藥物包封脂質體的定制實驗室規模脂質體制劑，例如Clodrosome®（氯膦酸鹽脂質體），Encapsome®（用于氯膦酸鹽脂質體的純對照脂質體），Doxosome™（多柔比星脂質體），Immunosome™（用于抗體的反應性脂質體，蛋白質）結合），Immunodox™（抗體的反應性脂質體，含有多柔比星的蛋白質結合物），Immunogene™（抗體的反應性脂質體，含有遺傳物質的蛋白質結合物），Immunofluor™（抗體的反應性脂質體，包含用于追蹤的熒光分子的蛋白質綴合物），Genesome TM（脂質體DNA和RNA），Fluoroliposome TM（熒光脂質體），Atpsome TM（ATP脂質體），Cellsome TM（普通脂質體作為人工細胞模型）和Cosmesome TM（用于皮膚病學的脂質體） ）對大學和工業研究實驗室的客戶。Encapsula NanoSciences近還推出了兩種口服脂質體產品系列; 適用于寵物的NanoLife Nutra和適用于人類的NanoLife Tonics。

encapsula IMS-2011說明書

表面活性脂質體（Immunosome®）

有許多化學物質可用于將抗體和其他反應性分子綴合到脂質體表面。表面反應性脂質體可以與抗體的N-末端或C-末端綴合。它們可以與硫醇化抗體或Fab'片段上的游離硫綴合。

表面活性脂質體（Immunosome®）

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

SKU＃IMS-2011

描述

在過去的五十年中，已經使用各種類型的化學物質將諸如抗體，肽，蛋白質或其他反應性配體的分子綴合到脂質體的表面。通常，綴合可以通過N-末端，C-末端或可用的硫（例如 Fab'級分或硫醇化抗體）實現。并非所有化學物質具有相同的產率和綴合效率，并且通常再生生物相容性批次可能是一個挑戰。

葉酸結合蛋白（FBP）是一種內源蛋白，對葉酸顯示出非常高的親和力。可以通過FBP標記抗體，并且可以通過脂質體表面上的FBP和葉酸脂質之間的非共價和高親和力相互作用形成免疫脂質體。在該方法中，已經通過硫醚鍵與FBP共價連接的抗體與葉酸衍生物脂質體綴合。具有相對低的分子量（MW~40kDa）和單一結合位點可防止脂質體交聯。

Immunosome®-Folate是PEG化產物。對于適用于其他類型的綴合方法的其他反應性（PEG化和非PEG化產物）Immunosome®產品，

配方信息

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

脂質成分	濃度（mg / ml）	濃度（mM）	摩爾比百分比
總	15.86毫克/毫升	21.55 mM	100
氫化大豆PC	9.58	12.22	57
膽固醇	3.19	8.25	38
DSPE-PEG（2000）	2.7	0.96	4.5
DSPE-PEG（2000）-Folate	0.39	0.12	0.5

共軛議定書

材料和設備

為了將您的抗體或FBP標記的蛋白與Immunosome®-Folate脂質體結合，您需要：

1. 建議使用實驗室渦旋混合器。
2. 透析需要實驗室磁力攪拌器。
3. Float-A-Lyzer®  具有適當的MWCO，可輕松從游離和非共軛蛋白質/肽/配體中清除脂質體偶聯配體。您需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時，透析膜上的孔徑接近100 nm，因此您的脂質體可以透析出來。你不能盲目使用透析盒。在使用旋轉柱或透析盒之前，請先了解該技術。如果您沒有使用正確的MWCO，您可能會失去整個準備工作。對于該協議，我們建議MWCO為300,000道爾頓。

制備方法

1. Immunosome®-Folate中的總脂質濃度為21.55 mM。脂質體中0.5％mol的脂質含有PEG-葉酸基團，并且其中僅一半暴露于脂質體的外部，其等于0.053mM的反應性可綴合脂質。對于2ml體積的脂質體，這等于1.08×10 -7 mol，對于5ml體積的脂質體，這等于2.69×10 -7mol的PEG-葉酸。 加入1:20摩爾比的用FBP標記的抗體與PEG-葉酸脂質。
2. 我將Immunosome®-Folate與抗體-FBP在室溫下孵育1小時。
3. 通過透析去除未綴合的抗體，蛋白質，肽或配體。我們更喜歡透析以確定排除柱的大小。透析是一個慢得多的過程，但是從非偶聯蛋白質/肽/配體中清除制劑后，免疫脂質體的損失小。旋轉柱速度非常快，但旋轉柱上的脂質體很容易丟失50％以上。我們建議使用Spectrum Labs的Float-A-Lyzer®透析盒。您需要根據蛋白質，配體，抗體或抗體片段的MW選擇具有適當MWCO的盒式磁帶。 注意：如果您決定使用透析盒，則需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時，透析膜上的孔徑接近100 nm，因此您的脂質體可以透析出來。您不能盲目使用透析盒和旋轉柱。它們有各種尺寸，您需要明智地選擇正確的尺寸。將免疫脂質體溶液在pH7.4的1升PBS中透析8小時。用新鮮的1升PBS更換透析緩沖液，再透析8小時。完成此步驟后，即可使用已清理過的免疫脂質體。如果您沒有使用正確的MWCO，您可能會失去整個準備工作。

脂質體粒子計算器

免疫體是單層脂質體，大小為100nm。脂質體的摩爾濃度為10mM。通過具有 脂質體直徑（nm）和脂質濃度（μM），可以計算一個脂質體中脂質的總數和1毫升脂質體溶液中脂質體的數量。要使用計算器，

技術說明

• 請記住，主要用于表面含有葉酸的脂質體用于靶向細胞上的葉酸受體。使用用FBP標記的抗體/蛋白質或配體制備免疫脂質體是非常適合的應用。
• 由于在低pH下葉酸和FBP之間的親和力降低，免疫脂質體可在暴露于內體區室的低pH環境后通過內吞作用而內化后解體。通過允許將內化脂質體分選到合適的亞細胞區室和/或促進藥物分子從脂質體的細胞內釋放，這種內化觸發的解偶聯可能有益于在細胞水平上遞送脂質體藥物。
• 可以使用尺寸排阻旋轉柱如Sepharose®CL-4B代替Float-A-Lyzer®透析盒。然而，在清理過程中會有非常大量的脂質體粘附在柱子上，因此我們強烈建議使用透析而不是尺寸*的珠子。
• 如果您使用疏水的配體或肽，建議將其溶解在DMSO或DMF中，然后將緩沖液加入其中。建議溶液中不要使用超過5％體積的DMSO或DMF。DMF和DMSO均與脂質體相容，并且它們也可與水混溶。其他有機溶劑如乙醇和氯方與脂質體不相容并會導致脂質體溶解。如果您終使用DMSO或DMF，那么在完成綴合反應后，您需要從脂質體中去除DMSO和DMF。為此，您需要使用由REGENERATED CELLULOSE MEMBRANE制成的透析盒。注意：并非所有膜都與DMF和DMSO兼容。我們建議使用Slide-A-Lyzer™MINI透析裝置MWCO為2K，由ThermoFisher生產的再生纖維素膜制成。除去DMSO或DMF后，您可以使用Float-A-Lyzer®透析裝置進行清潔制劑的后步驟。
• 脂質體應保持在4°C，切勿冷凍。

出現

Immunosome®-Folate是一種由納米尺寸單層脂質體制成的白色半透明液體。通常由于脂質體的小尺寸，在小瓶的底部不會發生沉降。將脂質體包裝在琥珀色小瓶中。 

訂購/運輸信息

• 所有基于脂質體的制劑在隔熱包裝中使用隔夜運輸或快遞運輸在4°C的藍色冰上運輸。
• 脂質體不應該被冷凍。在脂質膜中形成的結晶冰可破壞膜，改變脂質體的大小并導致包封的藥物泄漏。液體形式的脂質體應始終保存在冰箱中。
• 從美利堅合眾國境外訂購的客戶負責其政府進口稅和海關文書工作。Encapsula NanoSciences不對美國以外國家的進口費負責。
• 我們強烈鼓勵日本，韓國，中國臺灣和中國的客戶通過經銷商訂購。如果直接通過我們訂購，這些國家的嚴格通關規定將導致這些易腐配方的定制清關延遲。經銷商可以輕松清關海關包裹。要查看經銷商列表，請單擊此處。
• 從澳大利亞的大學和研究機構訂購的客戶應該記住，脂質體配方是由合成材料制成的，配方不需要“允許進口檢疫材料”。脂質體不是生物制品。
• 如果您希望您的學院的FedEx或DHL帳戶收取運費，請在訂購時提供帳號。
• Encapsula NanoSciences無法控制因惡劣天氣或清關延誤造成的延誤。確認訂單后，您將收到FedEx或DHL跟蹤號碼。提前聯系FedEx或DHL，確保海關的文書工作按時完成。

儲存和保質期

存儲

Immunosome®產品應始終在4°C??的黑暗中儲存，除非在動物給藥前短時間內置于室溫。不要凍結。如果懸浮液被冷凍，則包封的藥物可以從脂質體中釋放，從而限制其有效性。此外，脂質體的大小也會在冷凍和解凍時發生變化。

保質期

Immunosome®-Folate每天制作。裝運的批次是在同一天生產的。建議在生產日期后4個月內使用產品。