Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同制造和合同研究。

haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同制造和合同研究。

haemtech HCT-0020說明書

Thrombin (alpha)

凝血酶（alpha）

凝血酶原
的蛋白水解活化絲氨酸蛋白酶α-凝血酶通過酶原激活凝血酶原而產生。酶復合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個肽鍵的蛋白水解，產生NH2末端衍生的F1.2區和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“A”鏈（Mr = 6000）組成，其通過單個二硫鍵與“B”鏈（Mr = 31,000）共價連接。

 HCT-0020 人類α-凝血酶

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 HCT-DFP 人類α-凝血酶，

 HCT-FPRCK 人類α-凝血酶，PPACK（FPRck）活性位點被阻止

 HCT-BFPRCK 人α-凝血酶，生物素化PPACK（FPRck）活性位點阻斷

 BCT-1020 牛α-凝血酶

 BCT-DFP 牛α-Thrombin，

 BCT-FPRCK 牛α-凝血酶，PPACK（FPRck）活性位點被阻止

 BCT-BFPRCK 牛α-凝血酶，生物素化PPACK（FPRck）活性位點封閉

 MCT-5020 小鼠α-凝血酶

α-凝血酶是通過酶原凝血酶原的蛋白水解活化產生的高度特異性絲氨酸蛋白酶（1）。在凝血期間，凝血酶裂解纖維蛋白原以形成纖維蛋白，導致凝血的終步驟，形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負責反應激活因子V因子和因子VIII。據報道，凝血酶還激活因子XIII和血小板，并且還起血管收縮蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性以兩種方式停止：1）通過肝素輔助因子II或抗凝血酶III /肝素復合物抑制; 或2）與血栓調節蛋白形成復合物。凝血酶/血栓調節蛋白復合物的形成導致凝血酶不能切割纖維蛋白原并激活因子V和VIII，

凝血酶是由NH2-末端“A”鏈（Mr = 6,000）和COOH-末端“B”鏈（Mr = 31,000）組成的雙鏈酶，其通過單個二硫鍵保持共價結合。人凝血酶比牛凝血酶短13個氨基酸，這是由于人蛋白上的凝血酶切割位點不存在于牛蛋白中。

凝血酶還用于細菌中表達的融合蛋白的位點特異性切割（9-11）。凝血酶敏感位點摻入目的重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質之間。通過用凝血酶切割，從表達的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。

使用如Nesheim等人所述的Lundblad程序（1）的修改，由純化的凝血酶原制備人，牛和小鼠凝血酶。（2）。凝血酶以50％（vol / vol）甘油/ H2O供應，應儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度，并在凝血酶特異性凝固測定中測量活性，并與標準化的NIH凝血酶進行比較。凝血酶也可用活性位點用DFP，FPRck或生物素化的FPRck阻斷。

融合蛋白的切割
除了在凝血研究中的廣泛應用外，凝血酶還可用于融合蛋白的位點特異性切割。凝血酶敏感位點摻入目的重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質之間。通過用凝血酶切割，從表達的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。批次一致性確保每次都可重現的結果。對于涉及細胞培養的實驗，請與我們聯系，討論用于細胞培養的定制低內毒素批次。

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