Haematologic HCP-0010說明書

HTI HCP-0010

Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同制造和合同研究。

Haematologic HCP-0010說明書

Prothrombin and Fragments

凝血酶原和片段

凝血酶原
的結構域表示凝血酶原的結構域結構，其中：GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區域，KRINGLE =內部序列同源性區域，催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯體的區域。箭頭表示在酶原激活期間被因子Xa蛋白水解切割的位點。

 HCP-0010 人體凝血酶原

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 HCP1-0010 人類凝血酶原片段1

 HCP12-0010 人類凝血酶原片段1.2

 HCP2-0010 人類凝血酶原片段2

 HCP1-0011 人類凝血酶原-1

 HCP2-0011 人類凝血酶原-2

 BCP-1010 牛凝血酶原

 MCP-5010 鼠標凝血酶原

· 概觀

凝血酶原是一種維生素K依賴性血漿蛋白，在肝臟中合成（1）。在分泌到血漿中之前，凝血酶原通過維生素K依賴性羧化酶進行翻譯后修飾，該羧化酶將10種特異性谷氨酸殘基轉化為γ-羧基谷氨酸（gla）。10個gla殘基位于成熟蛋白質的前40個氨基酸內，并且有助于凝血酶原結合帶負電荷的磷脂膜的能力。凝血酶原包含兩個內部同源區域，稱為“kringle”結構。這些顯著的二級結構區域位于成熟血漿蛋白的殘基40和270之間，并取代在幾種其他血漿絲氨酸蛋白酶中發現的生長因子結構域。到目前為止，這些地區沒有任何功能，但有人懷疑它們可能在涉及凝血酶原的幾種二元蛋白質相互作用中發揮作用。成熟的單鏈蛋白質作為酶原在血漿中循環，并且在凝固過程中，蛋白水解活化成有效的絲氨酸蛋白酶α-凝血酶。這種蛋白水解是由凝血酶原酶復合物催化的。在激活期間，凝血酶原在Arg271-Thr272（人）/ Arg273-Thr274（牛）和Arg320-Ser321（人）/ Arg323-Ser324（牛）切割成“pro”片段（片段1.2）和凝血酶，后者其中兩條鏈由二硫鍵共價連接。在人凝血酶原/凝血酶的情況下，在Arg284-Thr285處存在另外的凝血酶反饋切割，導致從成熟凝血酶“A”鏈中除去另外的13個氨基酸。

如Bajaj及其同事所述，人凝血酶原由新鮮冷凍的人血漿制備（2）。使用Owen及其同事描述的方法的改進，從新鮮牛血漿制備牛凝血酶原（3）。純化的凝血酶原以50％（vol / vol）甘油/ H2O供應，應儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析測定純度，并在凝血酶原轉化為凝血酶后通過凝固和/或生色底物測定來測量活性。

• Mann，KG等，Methods in Enzymology，45,156（1976）。
• Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
• Owen，WG，et al。，J.Biol.Chem。Chem。，249,594（1974）。
• Kisiel，W.，et al。，Biochem。生物物理學。Acta，304,103（1973）。
• Magnusson，S.，et al。，In Proteases in Biological Control，ed。E. Reich，DB Rifkin，E。Shaw，pp.123-149。紐約：冷泉港實驗室，1975年。
• Discipio，RG等，Biochemistry，18,899（1979）。

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