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genaxxon M3009.0250說明書

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genaxxon M3009.0250說明書


SNP Pol DNA Polymerase

貨號: M3009.0250

運輸:濕冰運輸,-20°C 儲存

“SNP Pol DNA聚合酶"產品信息

SNP Pol DNA 聚合酶,用于簡單、可靠和快速的等位基因特異性鑒別,例如。CRISPR / Cas9 點突變,用于檢測不正確的 CRISPR / Cas9 產品,或驗證測序結果。SNP Pol DNA 聚合酶具有高度特異性,無論是否存在引物-模板-復合物的錯配。錯配(點突變)必須位于引物的 3' 端。因此,突變等位基因可以與野生型等位基因準確區分開來——無需測序,因為聚合酶在錯配的情況下根本不會擴增。

只需將您的引物放在假定的點突變上(重要:點突變必須在 3' 末端),聚合酶將以幾乎 100% 的準確度檢測該區域的錯配:如果模板堿基與 3' 末端互補引物顯示突變,而引物沒有,不會發生擴增 - 短時間內 100% 確定!
因此,SNP Pol DNA 聚合酶可以輕松、省時且經濟高效地用于點突變的篩選。

變體SNP PolTaq DNA 聚合酶 >具有 5'-3' 核酸酶活性,因此可用于特定水解探針,例如 Taqman® 探針或分子信標。

以*提供測試樣品!德國境內無運費。測試樣品價格將在產品的第一個正式訂單中退還。

說明
SNP波爾DNA聚合酶>(您好GH狄單核苷酸scrimination) 是一種高度選擇性的 DNA 聚合酶。它專為需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開發:例如在等位基因特異性 PCR (ASA; AS-PCR)、等位基因特異性引物延伸 (AS-PEX)、SNP 分析、基因分型或甲基化- 特異性 PCR (MSP)。許多其他 DNA 聚合酶耐受錯配的引物-模板復合物,因此不適合。另一方面,SNP Pol DNA 聚合酶專門區分這些(高辨別力)并僅提供具有匹配引物對的 PCR 產物!Genaxxon SNP Pol 和 SNP PolTaq DNA 聚合酶通過兩個等位基因之間的等位基因特異性 PCR 差異高達 100%,并且在簡單的 qPCR 后,給出關于存在哪個等位基因的明確結果。因此,

等位基因特異性 PCR 可用于量化野生型序列庫或背景中的突變率。NGS確定的突變頻率的驗證  也可以通過等位基因特異性 PCR 和 SNP Pol DNA 聚合酶來驗證。SNP PolTaq DNA 聚合酶非常適用于液體活檢 樣品的分析 。使用 SNP PolTaq,可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。

下圖:應用說明 SNP Pol DNA 聚合酶

HiDi DNA 聚合酶的應用說明

 

我們建議設計具有較短擴增子長度(約 60-200 bp)的引物以獲得最佳結果,但更長的擴增子長度也是可能的。如果更長的擴增子 > 500 bp,可能需要添加額外的鎂 (+0.5 - 1.5mM)。

SNP Pol DNA 聚合酶(M3009 >或M3061 >)可與非特異性熒光染料(例如 Genaxxon's Green DNA Dye >或 SybrGreen®)一起用于實時 PCR。當使用特定的 PCR 探針時,只能使用 SNP PolTaq DNA 聚合酶,因為只有它們具有 5'-3' 核酸外切酶活性。

憑借我們的高品質 dNTPs Set (M3015.4100) >或Mix (M3016.1010) >或我們的DNA Ladders >以及我們有利的標準瓊脂糖 (M3044) >我們可以為您的 PCR 提供其他產品。

SNP Pol DNA 和 SNP Pol DNA 聚合酶的應用領域
- 點突變的監測、驗證和檢測
- 識別正確或錯誤的 CRISPR/Cas9 產品
- 測序結果的驗證/驗證
- 突變的量化(例如 NGS 結果)
- SNP 檢測通過等位基因特異性擴增 (ASA) / 等位基因特異性 PCR 
- 亞硫酸氫鹽處理的 DNA(CpG 甲基化側)后的甲基化特異性 PCR (MSP) 
- HLA 基因分型
- 微測序
- 使用水解探針的實時 PCR 
- 實時多重 PCR

- 秀麗隱桿線蟲中的 DamID-seq 數據。

作為 ChIP 的替代方案,最近顯示通過測序鑒定 DNA 腺嘌呤甲基轉移酶 (DamID-seq) 能夠表征單個哺乳動物細胞中的結合位點。此外,DamID 可以通過在組織特異性啟動子下以受控方式表達 Dam 融合蛋白來實現細胞類型特異性分析。在本報告中,我們提出了一個用戶友好的管道來分析秀麗隱桿線蟲中的 DamID-seq 數據。

Sharma R、Ritler D、Meister P.
秀麗隱桿線蟲發育過程中核組織 DNA 腺嘌呤甲基轉移酶鑒定分析的工具。創世紀。2016 年 2 月 4 日。doi:10.1002/dvg.22925。

- 使用 SNPase DNA 聚合酶進行 SNP 基因分型的微量測序可以通過以下描述的程序進行:

Lovmar L、Fredriksson M、Liljedahl U、Sigurdsson S、Syv?nen AC。 
通過微型測序和微陣列進行的定量評估揭示了全基因組擴增 DNA 的準確多重 SNP 基因分型。核酸研究。2003;31:e129。

- HiDi DNA 聚合酶的等位基因特異性錯配選擇性

Drum M、Kranaster R、Ewald C、Blasczyk R、Marx A (2014) 在等位基因和甲基化特異性擴增中具有更高選擇性的水生棲熱菌 DNA 聚合酶變體。PLoS 一 9(5):e96640。doi:10.1371/journal.pone.0096640

 

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