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abbexa abx251458說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2020-06-12 點(diǎn)擊次數(shù)：1648

abbexa abx251458說(shuō)明書(shū)

人催乳素誘導(dǎo)蛋白（PIP）ELISA試劑盒

貨號(hào)： abx251458

人催乳素誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒是針對(duì)人催乳素誘導(dǎo)蛋白（PIP）的ELISA試劑盒。

目標(biāo)	催乳素誘導(dǎo)蛋白
反應(yīng)性	人的
經(jīng)過(guò)測(cè)試的應(yīng)用	ELISA法
建議稀釋	宜稀釋度/濃度應(yīng)由終用戶確定。
存儲(chǔ)	裝運(yùn)溫度為4°C。收到后，按照試劑盒手冊(cè)中的存放說(shuō)明存放試劑盒。
有效期	該套件的有效期為6個(gè)月。
穩(wěn)定性	試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下，有效期內(nèi)的丟失率小于5％。為了大程度地降低性能波動(dòng)，應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)試始終由同一用戶執(zhí)行。
UniProt主AC	P12273（UniProt， ExPASy）
UniProt次級(jí)AC	A0A963，A0A9C3，A0A9F3，A4D2I1
UniProt條目名稱	PIP_HUMAN
基因符號(hào)	畫(huà)中畫(huà)
凱格	hsa：5304
串	9606.ENSP00000291009
測(cè)試范圍	31.2 pg / ml-2000 pg / ml
標(biāo)準(zhǔn)格式	凍干
ELISA檢測(cè)	比色法
ELISA類型	三明治
ELISA數(shù)據(jù)	定量的
樣品類型	血清，血漿和其他生物液體。
測(cè)定原理	該試劑盒基于三明治酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑，并孵育整個(gè)平板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后，只有包含足夠PIP的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上的PIP量成正比。在酶標(biāo)儀中于450 nm處用分光光度法測(cè)量光密度（OD），由此可計(jì)算出PIP的濃度。
套件組件	預(yù)涂96孔微孔板標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液洗滌緩沖液檢測(cè)試劑A 檢測(cè)試劑B 稀釋劑A 稀釋劑B TMB基板停止解決方案封口機(jī)
必需但未提供的材料	37°C恒溫箱多通道和單通道移液器以及無(wú)菌移液器吸頭噴瓶或自動(dòng)微孔板清洗機(jī) 1.5毫升管蒸餾水吸收性濾紙 100毫升和1升量筒酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)：450 nm） ELISA搖床
樣品收集/準(zhǔn)備	血清：應(yīng)將樣品收集到血清分離管中。在4°C或室溫下放置長(zhǎng)達(dá)60分鐘，使管子在垂直位置靜置過(guò)夜，以凝結(jié)血清。以約1000×g的速度離心20分鐘。立即分析血清或等分試樣并儲(chǔ)存在-20°C或-80°C下。血漿：使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。收集30分鐘內(nèi)以1000×g離心15分鐘。立即測(cè)定或分裝并保存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高膽固醇樣品。組織勻漿：組織勻漿的制備取決于組織類型-這僅是示例。用冰冷的PBS沖洗組織以去除多余的血液。均質(zhì)前稱重。切碎組織，用組織勻漿器在PBS中的冰上勻漿并超聲處理細(xì)胞懸液。將勻漿以5000×g離心5分鐘，收集上清液。立即測(cè)定或等分試樣并在-20°C儲(chǔ)存。
試劑準(zhǔn)備	1）標(biāo)準(zhǔn)液：用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制標(biāo)準(zhǔn)液，制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后按照協(xié)議中的說(shuō)明，使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列稀釋。 2）洗滌緩沖液：按照協(xié)議中的說(shuō)明，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。 3）檢測(cè)試劑制備：計(jì)算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1：100稀釋檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B。
測(cè)定步驟	1）設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)試樣品和對(duì)照孔。 2）將100μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。 3）將100μl標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液等分到對(duì)照（零）孔中。 4）將100μl稀釋的樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。 5）將100μl檢測(cè)試劑A分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。 6）洗3次。 7）將100μl檢測(cè)試劑B分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育30分鐘。 8）洗5次。 9）將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。 10）等分50μl終止溶液。 11）在450 nm下測(cè)量OD。
協(xié)議	使用前，將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫（18-25°C）。建議為每個(gè)測(cè)試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 1.分別在預(yù)涂板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)試樣品和對(duì)照（零）孔，然后記錄其位置。建議測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品至少一式兩份。 2.將100 µL的每種標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照和樣品加到適當(dāng)?shù)目字小Ｓ蒙w密封板并在37°C孵育1小時(shí)。 3.取下蓋子并丟棄液體。 4.向每個(gè)孔中添加100μl檢測(cè)試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C孵育1小時(shí)。 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer洗滌板3次。 6.將100 µL檢測(cè)試劑B工作溶液添加到每個(gè)孔中，密封并在37°C孵育30分鐘。 7.棄去溶液并按照上一步中的說(shuō)明用洗滌緩沖液洗滌板5次。 8.將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線下。孵育時(shí)間僅供參考，宜時(shí)間應(yīng)由用戶確定。請(qǐng)勿超過(guò)30分鐘。 9.向每個(gè)孔中添加50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結(jié)果計(jì)算	為了進(jìn)行計(jì)算，請(qǐng)對(duì)每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)品和每個(gè)樣品的OD450重復(fù)讀數(shù)取平均值，然后減去平均對(duì)照（零）OD450讀數(shù)。可以將標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制為每種參考標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對(duì)OD450與每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的各自濃度的關(guān)系。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插樣品的PIP濃度。
可用性	在5-12個(gè)工作日內(nèi)發(fā)貨。
注意	本產(chǎn)品僅供研究使用。范圍和靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化。請(qǐng)注意，我們的ELISA和CLIA試劑盒針對(duì)檢測(cè)天然樣品（而非重組蛋白）進(jìn)行了優(yōu)化。我們無(wú)法保證檢測(cè)到重組蛋白，因?yàn)樗鼈兣c天然蛋白可能具有不同的序列或三級(jí)結(jié)構(gòu)。

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