qa-bio E-S001說明書

Sialidase Au

唾液酸酶
尿毒癥重組菌
零件號-酶的量
E-S001–60微升
E-S001-20–20微升
E-S001-200–200微升平方英寸
1包括緩沖器
僅包括酶

神經(jīng)氨酸酶
α（2-3,6,8,9）唾液酸酶Au能切割復(fù)雜碳水化合物和糖蛋白中所有非還原性末端唾液酸殘基。不同鍵的相對解理速率為：
α（2-6）>α（2-3）>α（2-8），α（2-9）。
此外，這種酶會分解支鏈唾液酸（與內(nèi)部殘留物相連）。這種特性使得它在唾液酸酶中是僅有的。切割支鏈殘基可能需要高濃度的酶和較長的培養(yǎng)時間。要僅切割非還原性末端α（2-3）不分枝唾液酸殘基，請使用唾液酸酶SP，零件號E-S007。
α-（2-3,6,8,9）唾液酸酶是從一株解脲桿菌中分離得到的。利用寡糖標(biāo)準(zhǔn)對酶進行了廣泛的表征。
來源于大腸桿菌中的脲桿菌重組體。
酶代碼EC3.2.1.18
目錄
20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl，pH 7.5中的唾液酸酶
包括20微升和60微升包裝尺寸：
5x反應(yīng)緩沖液250 mM磷酸鈉，pH 6.0
比活性>135u/mg
活性>5u/ml
分子量70000道爾頓
pH值范圍4.5-7，宜值6.0
推薦的緩沖液濃縮液為標(biāo)準(zhǔn)底物的酶活性提供了宜的pH值。如果由于糖蛋白溶解度或活性要求，在亞宜pH下進行糖苷酶處理，酶活性預(yù)計會有所降低。
建議使用
一。向試管中加入100μg糖蛋白或1 nmol低聚糖。
2。加水至14μL
三。加入4μL 5X反應(yīng)緩沖液。
四。加入2μLα（2-3，6，8，9）唾液酸酶。
5個。37℃孵育1小時。
如果天然蛋白和脫乙酰蛋白之間的大小差異足以進行檢測，則可以通過SDS-PAGE監(jiān)測脫乙酰。
注：如果存在支鏈唾液酸，則需要更長的培養(yǎng)時間。
特異性切割所有非還原性末端支鏈和不支鏈唾液酸
比活度定義為在37℃、pH值為5.0的條件下，在1分鐘內(nèi)從MU-NaNaNa[2'-（4-甲基傘形烯基）-α-D-N-乙酰神經(jīng)氨酸]中產(chǎn)生1微摩爾甲基傘形酮所需的酶的量。
在4℃下儲存酶。
純度每批α（2-3,6,8,9）唾液酸酶的污染蛋白酶測試如下；10μg變性BSA與2μL酶孵育24小時。SDS-PAGE分析表明處理后的牛血清白蛋白沒有降解跡象。
生產(chǎn)宿主菌株已被廣泛測試，不產(chǎn)生任何可檢測的糖苷酶。
適當(dāng)儲存時，穩(wěn)定性至少穩(wěn)定12個月。暴露在環(huán)境溫度下幾天不會減少活動。酶在37攝氏度下保持活性至少一周。