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上海起發(fā)現(xiàn)貨genebridges K003說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2019-09-25      點(diǎn)擊次數(shù):2068

Gene Bridges擁有Red / ET重組的專有權(quán)利,并被允許頒發(fā)該技術(shù)的許可證并提供重組服務(wù)。任何其他學(xué)術(shù)或商業(yè)組織均無(wú)權(quán)提供重組服務(wù)。

 

與Red / ET重組可在任何選定位置克隆,亞克隆和修飾DNA。它可以改造任何大小的DNA分子,包括很大的分子,例如BAC或大腸桿菌染色體。

 

Red / ET重組增加了CRISPR / Cas9擴(kuò)展基因組研究的能力。作為歐盟資助的項(xiàng)目AgedBrainSYSBIO的一部分,我們開(kāi)發(fā)了一種新的策略來(lái)使大型基因組區(qū)域人性化。通過(guò)將CRISPR / Cas9與Red / ET重組相結(jié)合我們成功地一個(gè)33 kb的人類片段敲入了小鼠ApoE基因座。閱讀我們  近發(fā)布的作品  以獲取更多詳細(xì)信息。

 

4路重組(4WR)提供了一種新的快速且簡(jiǎn)化的方法,可在單個(gè)體內(nèi)重組步驟中從多達(dá)四個(gè)DNA片段(例如PCR產(chǎn)物)組裝質(zhì)粒。4WR是Gene Bridges廣受歡迎的直接克隆型大腸桿菌菌株GB05-dir(目錄號(hào)K008)的新應(yīng)用。

 

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BAC Subcloning Kit

BAC亞克隆試劑盒

特征

  • 無(wú)需限制位點(diǎn)

  • 多可克隆20 kb的片段

  • 高紅色/ ET效率

  • 重組后可方便地去除Red / ET重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒pRedET。

應(yīng)用

  • 將堿基對(duì)從BAC的DNA片段亞克隆到高拷貝質(zhì)粒主鏈中

描述

可以包含大插入片段的大腸桿菌載體,例如細(xì)菌人工染色體(BAC),為功能基因組學(xué)提供了多個(gè)優(yōu)勢(shì)。它們可以攜帶足夠的DNA,在單個(gè)分子中包含大多數(shù)真核基因,包括所有順式作用調(diào)控元件,以及許多真核基因簇,原核調(diào)節(jié)子和許多完整的病毒基因組。然而,常規(guī)的克隆方法依賴于限制酶的使用和體外純化步驟,這排除了大分子的工程改造。因此,直到近,這種分子的用途才受到限制。

BAC亞克隆試劑盒旨在通過(guò)Red / ET重組從任何類型的細(xì)菌人工染色體(BAC)有效地將高達(dá)20 kb的大DNA片段亞克隆到質(zhì)粒載體中。

Red / ET重組(重組)是一種允許對(duì)任何大小的DNA分子進(jìn)行工程改造的方法,包括非常大的分子,例如BAC或大腸桿菌染色體。它依賴于在體內(nèi)同源重組的大腸桿菌,并允許范圍廣泛的具有DNA分子修飾在任何選定的位置上。

內(nèi)容

  • Red / ET重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒pRed / ET,通過(guò)此質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,可將任何大腸桿菌菌株制成Red / ET精通

  • 帶有ColE1復(fù)制起點(diǎn)和氨芐青霉素抗性基因的線性載體將用于亞克隆實(shí)驗(yàn)

  • 陽(yáng)性對(duì)照,可將來(lái)自對(duì)照BAC的15 kb片段亞克隆到試劑盒隨附的載體中

  • 詳細(xì)的協(xié)議,質(zhì)粒,圖譜和序列的描述

 

序列

ColE1小向量

 

放大器ColE1 ORI

 

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAATACATCAGAGAGATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGATAATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT

 

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